*林环张易林少宾吴坚柱方群王子莲
医院妇产科
目的探讨单合子之单绒毛膜双羊膜囊（monochorionicdiamniotic,MCDA）双胎之一胎先天性心脏病（简称“先心病”）产前诊断。方法年1月至年6月在医院妇产科就诊的MCDA双胎之一胎先心病共79对，每对胎儿分别行羊膜腔穿刺，羊水标本送检染色体核型分析和染色体微阵列分析（chromosomalmicroarrayanalysis,CMA），并对其产前诊断的结果进行临床分析。结果79对中75对共个胎儿进行了CMA，71对共个胎儿进行染色体核型分析。染色体核型异常检出率为7.7%（11/）；除外良性拷贝数变异（copynumbervariant,CNV），CMA对CNV和非整倍体的检出率为21.3%（32/），高于核型分析（c2=8.，P=0.）；核型正常胎儿异常CNV检出率为16.0%（21/）。5对单合子双胎两个胎儿间存在不一致的染色体核型或CNV，发生率为7.0%（5/71），其中4对先心病胎儿检出异常核型或CNV，而心脏发育正常胎未检出异常。结论对于先心病的产前诊断，CMA较传统的核型分析具有更高的检出率。单绒双胎尤其单合子双胎可存在遗传异质性，当MCDA双胎出现先心病，尤其两胎表型不一致时，有必要对双胎同时进行侵入性产前诊断。
先天性心脏病(简称“先心病”)，是胚胎及胎儿时期心脏及其血管发育异常或在胚胎早期停止发育所致的出生缺陷疾病，发病率在活产儿中为8‰～10‰，是人类出生缺陷发病率最高的疾病。
已有回顾性临床研究数据显示，先心病在双胎中的发病率较单胎更高（1.7%~7.5%vs1.8%~2%），为单胎妊娠的3～7倍，其中单合子双胎先心病的发生率远高于双合子双胎，单合子之单绒毛膜双羊膜囊（monochorionic-diamniotic,MCDA）双胎常会发生两胎发育不一致，导致围产结局显著不同。
本研究拟通过对一胎发生先心病的MCDA双胎产前诊断结果进行分析，探讨MCDA双胎之一胎儿发生先心病的产前临床咨询和管理策略，并进一步为先心病的病因学研究提供依据。
资料与方法
一、研究对象
收集年1月至年6月就诊于医院妇产科的双胎妊娠孕妇的临床资料。纳入标准为MCDA双胎，一胎超声检出心血管异常，另一胎心脏发育正常。
二、研究方法
1.资料收集：
采用回顾性研究分析方法，医院病历系统数据库收集患者的临床资料。
2.产前超声检查：
采用GEVolusonE8超声仪对胎儿进行检查，高分辨超声波扫查胎儿心脏标准切面，包括四腔心切面、动脉流出道和大血管切面；胎儿超声心动图扫查切面包括心尖四腔切面、大动脉长轴切面、大动脉短轴切面、三血管切面、上（下）腔静脉切面、主动脉（动脉导管）弓切面等。
3.双绒毛膜性的鉴定：
早孕期超声检查显示双胎间“T”征并在中晚期超声提示双胎性别相同，可初步判定为单绒毛膜双胎；分娩后检查胎盘分隔处为两层羊膜，则为MCDA双胎。
4.胎儿标本的采集：
孕妇在知情同意情况下进行超声介导下羊膜腔穿刺术，获得胎儿羊水标本。原则上对MCDA双胎的两个胎儿均同时进行羊膜腔穿刺。
5.染色体核型分析：
胎儿羊水标本按常规进行细胞培养，收获细胞后常规检查及G显带核型分析，显微镜下计数30个分裂相，分析5个，如果遇到嵌合体加大计数量。
6.染色体微阵列分析（chromosomalmicroarrayanalysis,CMA）：
采用美国Affymetrix公司的CytoScanHD芯片平台（Genome-WideHumanSNPArray）进行染色体微阵列分析，其包含个可用于检测全基因组范围内拷贝数变异（copynumbervariant,CNV）的探针，利用芯片平台对样本基因组DNA进行CNV扫描后配合GeneChipCNAT分析软件进行分析。根据美国医学遗传学指引，比对数据库，包括国际公共良性CNVs数据库(databaseofgenomicvariants，DGVs)、UCSCgenomebrowser、国际公共病理性CNVs数据库(databaseofchromosomalimbalanceandphenotypeinhumansusingensemblresources,DECIPHER)、人类孟德尔遗传数据库(onlinemendelianinheritanceinman,OMIM)和人类遗传学细胞遗传学微阵列委员会在线数据库(internationalstandardcytogenomicarrayconsortium,ISCA)等，将CNV可分为四类：致病性CNV、可能致病性CNV、意义未明的CNV（variationofunknownsignificance,VUS）以及良性CNV。本研究采用GRCH37(hg19)对基因组进行注释，参考网站