TUhjnbcbe - 2021/3/22 1:01:00
目的分析先天性高胰岛素血症(congenitalhyperinsulinism，CHI)的临床诊治和基因突变情况，丰富CHI基因突变谱。方法回顾性分析广西壮族自治区妇幼保健院新生儿科年11月至年11月收治的CHI患儿临床资料，均应用高通量测序技术检测CHI相关基因，应用polyphen2、SIFT、MutationTaster软件预测其致病性。结果共收集21例CHI患儿，平均出生体重g，52.4%(11/21)系大于胎龄儿，90.5%(19/21)生后3d内起病，33.3%(7/21)出现抽搐。二氮嗪治疗有效6例，奥曲肽治疗有效8例，7例二氮嗪和奥曲肽治疗均无效。行18-氟-左旋多巴PET-CT扫描11例，8例提示局灶型胰岛细胞增生，3例提示弥漫型胰岛细胞增生。8例局灶增生型患儿(包括7例药物治疗无效、1例奥曲肽治疗有效但出现明显肝损害患儿)接受胰腺部分切除术，术后病理均证实局灶型胰岛细胞增生，7例术后血糖正常，1例发展为胰岛素依赖型糖尿病；3例弥漫型患儿奥曲肽治疗有效，均未手术治疗。检测到致病/可疑致病突变13例(61.9%),包括ABCC8基因12例，KCNJ11基因1例；共发现15个突变位点，包括ABCC8基因位点14个，KCNJ11基因突变位点1个；发现3个新的ABCC8基因突变位点(exon13：c.CT,p．QX;exon22：c.delC,p．WGfs*5;exon33：c.CT,p．QX)，突变类型包括2个无义突变，1个移码突变；发现1个未见报道的KCNJ11基因错义突变(exon1：c.TA,p．HY)。结论胰腺部分切除术治疗局灶型胰岛细胞增生病变效果良好，但有发生糖尿病的风险。ABCC8基因和KCNJJ11基因突变是CHI的主要致病基因，不同基因突变类型对药物治疗反应不同。发现3个国内外尚未见报道的ABCC8基因突变，1个国内外尚未见报道的KCNJ11突变，丰富了基因突变谱。先天性高胰岛素血症(congenitalhyperinsulinism，CHI)以胰腺β细胞在严重低血糖时仍持续不适当分泌胰岛素为特点，是新生儿期顽固性低血糖最常见的原因[1]。新生儿低血糖发作频繁或持续时间长会影响大脑发育，甚至留下不可逆的神经系统后遗症。由于可替代的能量物质如游离脂肪酸和酮体利用受限，CHI患儿脑损伤程度可能更重。迄今45%～55%的CHI患儿被证实存在基因突变，9种基因突变与CHI相关，分为两大类：与离子通道相关的ABCC8、KCNJ11基因，与代谢相关的GLUD1、GCK、HADH、SLC16A1、UCP2、HNF4A和HNF1A基因[2]。新生儿CHI的治疗主要有二氮嗪、奥曲肽和外科手术治疗等。由于新生儿CHI的临床治疗效果存在较大的个体差异，该差异可能与患儿基因突变类型相关，因此明确CHI致病基因突变类型对于疾病的诊治和预后判断可能有重要意义。本文回顾性分析21例CHI患儿临床特征、治疗效果和基因突变结果，旨在了解CHI基因突变类型与临床诊治过程和疗效之间的关系，并丰富CHI基因谱。对象和方法一、研究对象选择年11月至年11月本院收治的CHI患儿临床资料进行回顾性分析。1．CHI诊断标准[3]：(1)静脉血糖2.6mmol/L；(2)同时符合以下4点：①存在胰岛素分泌异常：血清胰岛素2mIU/L；②胰高血糖素激发试验阳性：低血糖时静脉或肌肉注射胰高血糖素(0.5～1mg/次)后30～45min血糖上升1.7mmol/L；③葡萄糖输注速度8mg/(kg·min)以上才能维持血糖正常；④低脂肪酸血症和低酮血症：血浆游离脂肪酸1.5mmol/L，血浆β羟丁酸2.0mmol/L。2．排除标准：(1)长期应激导致的暂时性高胰岛素血症性低血糖，如孕母血糖控制不佳的糖尿病母亲婴儿、胎儿窘迫、小于胎龄儿、胎儿宫内发育迟缓、窒息、先天性畸形等；(2)孕母应用药物导致的新生儿高胰岛素血症性低血糖症，如降糖药、β受体阻滞剂、抗心律失常药、抗病*药、白细胞生长因子、干扰素等；(3)胰岛素瘤；(4)胰岛素抵抗综合征、胰岛自身免疫综合征；(5)引起低血糖的其他代谢性疾病，如糖原累积病、脂肪酸代谢紊乱等。二、研究方法1．资料收集：收集CHI患儿临床病历资料，记录性别、胎龄、出生体重、发病日龄、低血糖时症状、静脉血糖、静脉血胰岛素、胰高血糖素试验和影像学检查结果、药物和手术治疗效果、转归等。影像学检查包括胰腺增强CT、MRI或18-氟-左旋多巴PET-CT扫描检查等。2．胰腺18-氟-左旋多巴PET-CT扫描结果判断标准[4]：局灶型为病变部位18F-DOPA的摄取明显高于胰腺其余部位，弥散型为弥漫性18F-DOPA摄取增加，胰腺头部的放射性分布稍高于胰腺其他部位。3．基因提取和检测：入选患儿住院期间均经家属知情同意后抽取外周静脉血2ml(EDTA抗凝)，应用QIAamp全血DNA提取试剂盒(德国Qiagen公司)提取基因组DNA，然后送至医院分析遗传实验室行高通量测序(新生儿相关疾病的基因包)，包括CHI相关基因ABCC8、KCNJ11、GCK、GLUD1、HADH、HNF4A、UCP2。高通量测序采用IlluminaHiSeq平台，与人类参考基因组序列GRCh37/hg19比对，参照的转录本编号分别为ABCC8(NM_.3)、KCNJ11(NM_.3)、GCK(NM_.3)、GLUD1(NM_.3)、HNF4A(NM_.4)、HADH(NM_.2)、UCP2(NM_.2)，98%的目标捕获区域测序深度大于20X。采用WuXiNextCODE的临床序列分析软件(ClinicSequenceAnalyzer,CSA)分析与患儿表型相关的致病基因及具有临床意义的遗传突变。应用ANNOVAR、VEP软件以及注释程序注释突变数据，包括NCBIRefSeq、SwissPort进行基因注释，HGMD、OMIM、ClinVar进行疾病相